流動(dòng)相

MeOH：ACN：H₂O=40：18：42。

檢測器FLD 

激發(fā)波長(cháng)365nm，發(fā)射波長(cháng)450nm。

黃探長(cháng)到現場(chǎng)后首先要排查原因，具體步驟如下：

1、觀(guān)察光化學(xué)衍生器開(kāi)機正常，結合之前客戶(hù)的色譜圖，判斷衍生效果良好。

2、排查系統壓力高原因，我們售后小哥更換上月旭ODS-3新的活化好的色譜柱后，比較前后壓力，排查是否是舊柱子的原因。壓力依然高，并非柱子堵塞。

3、拆掉柱子系統背壓0.9Mpa，無(wú)堵塞現象，排除液相系統堵塞原因。

4、通過(guò)上述三步排查后，猜測可能是系統未平衡好，于是再次平衡1h，系統壓力17Mpa，依然較高，無(wú)法串聯(lián)光化學(xué)衍生器使用。

5、于是黃探長(cháng)考慮溫度對柱壓的影響，將柱溫箱溫度設置為40℃，平衡好后壓力降至12-13Mpa，串聯(lián)好光化學(xué)衍生器。

6、待系統穩定后，進(jìn)樣25μL混標，出峰正常。

7、鑒于之前客戶(hù)使用其他品牌ODS-2色譜柱分離度達不到藥典要求，黃探長(cháng)分別使用ODS-3及XB-C18兩種不同的色譜柱供測試。

實(shí)驗結果統計表

３、溫度對反壓的影響是反比關(guān)系，溫度升高，反壓降低，對某些流動(dòng)相的影響更大一些。

４、液相色譜儀各模塊之間的連接管路也會(huì )產(chǎn)生壓力，系統壓力與管路的長(cháng)度成正比，與管路直徑的四次方成反比（1/4D）。上述考慮的是柱外因素對系統壓力的影響，色譜柱對系統壓力的影響也很大，反壓與色譜柱長(cháng)度成正比，與填料顆粒度的平方成反比（2.5μｍ填料比3.5μｍ填料反壓高）。

常見(jiàn)壓力變化及原因:

１）溫度太低；

２）流速太高；

３）流動(dòng)相粘度大；

４）管路堵塞；

５）儀器或色譜柱堵塞；

６）壓力傳感器問(wèn)題。

１）系統內有滲漏處；

２）單向閥堵塞；

３）入口管路有氣泡；

４）溶劑濾頭堵塞；

５）所用溶劑不正確，儲液瓶中無(wú)溶劑；

６）溫度太高，流速太低；

７）泵未輸送流動(dòng)相；

８）泵關(guān)閉或保險絲斷了。

１）管路脫氣機排氣不充分；

２）流動(dòng)相未正確脫氣；

３）所用溶劑不混溶或易揮發(fā)；

４）壓力傳感器及泵問(wèn)題。